離心機(jī)是一種全球幾乎所有研究實驗室都在使用的儀器。離心是一個基本的實驗室操作過程,它使用離心機(jī)來分離復(fù)雜混合物中的組分。在高速度下離心實驗樣品,混合物中的組分會受到離心力的影響,使得較高密度的顆粒離開軸心方向移動,而密度小的顆粒則朝向軸心方向移動。這些顆粒會沉積在管底,形成所謂的沉淀物,這樣分離得到的樣品,或被稱為上清的余液,都可用作進(jìn)一步處理或者分析。
離心機(jī)操作:
在開始離心您的樣品之前,先要考慮溫度。如果您在使用一個冷凍離心機(jī),那么在開始前需要讓儀器內(nèi)部的溫度達(dá)到您的理想值,或者用別的方法來給轉(zhuǎn)頭降溫。離心即將開始前,需確定您所有的管蓋都蓋緊不會松開了。
在將離心管放入轉(zhuǎn)頭時,要保證每個樣品和另一個相對位置的樣品重量一致。如果您只有一個離心管,那就要找到另一個等重的離心管來保證平衡。
如果您有三個同樣重量的離心管,可以將它們擺成一個三角位置以保證相互平衡。重量平衡在離心中非常重要。離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭在高速運(yùn)動中有很高的動態(tài)能量。如果沒有正確平衡好,整個離心單位會脫離它所在的位置,造成嚴(yán)重的損害。
一旦您確定轉(zhuǎn)頭和蓋子都固定好了,就可開始離心,在速度達(dá)到您設(shè)定的轉(zhuǎn)速前不要離開。如果您發(fā)現(xiàn)問題,找一個有經(jīng)驗的實驗人員來幫助您。離心結(jié)束后,您應(yīng)當(dāng)會看見您的生物學(xué)樣品位于離心管底部的沉淀中。它已經(jīng)從稱為上清的余液中分離出來了。
可以通過傾倒,也就是直接倒出來去除上清,也可將上清吸出,就是用真空吸力將其吸出。純化的樣品可以被重新放回溶液中,這個過程稱之為重懸。重復(fù)離心細(xì)胞,然后吸出上清留下細(xì)胞,再用緩沖液重懸細(xì)胞,這個過程稱之為細(xì)胞洗滌。